Ecco i personaggi che sono presenti nel gioco:
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Ezio Auditore da Firenze: è il protagonista del gioco, che diventerà anch'esso assassino dopo la morte del padre. Il suo nome significa "aquila",dal latino Aetius,a sua volta derivante dal greco Aetos
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Desmond Miles: il discendente di Ezio Auditore. Deve rivivere i ricordi di Ezio per poter diventare un assassino.
Altaïr Ibn-La'Ahad: il protagonista del primo capitolo. Desmond ne rivivrà accidentalmente un breve ricordo.
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Giovanni Auditore da Firenze: è il padre di Ezio, un banchiere e anche assassino. Come il figlio e l'antenato, anche il suo nome è legato all'aquila: essa infatti è il simbolo dell'evangelista Giovanni.
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Mario Auditore: Fratello maggiore di Giovanni e Zio di Ezio. Mercenario, signore di Monteriggioni ed Assassino. Addestrerà Ezio e gli darà libero accesso alla villa come strumento per fermare la congiura.
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Leonardo da Vinci: famoso genio rinascimentale. Grande amico di Ezio,costruisce per lui degli strumenti basandosi sul codice di Altair. Ha un carattere eccentrico e molto amichevole.
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Lorenzo de Medici: è il sovrano della Repubblica fiorentina e il padre del mantenimento della pace nel corso del Rinascimento italiano. Diventerà il mandante degli omicidi di Ezio.
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Niccolò Machiavelli: è considerato uno dei fondatori della scienza politica moderna. Nel gioco si scopre essere membro degli Assassini.
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Lucy Stillman : ricercatrice del progetto Animus. (
https://livebythecreed.forumfree.it/?t=44986147 qui x la descrizione dettagliata di questo personaggio)
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Maria Auditore : moglie di Giovanni e madre di Ezio.
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Caterina Sforza: è famosa per il coraggio di sostenere la difesa militare dei suoi Stati. Dopo essere stata aiutata da Ezio a Forlì, rivela di avere molte simpatie per lui (tanto che molto probabilmente Ezio ne è stato l'amante).
